国科质检GB/T21605化学品急性吸入毒性试验方法

1范围

本标准规定了动物急性吸入毒性试验的试验目的、术语和定义.试验基本原则试验方法、试验报告 和结果解释。

本标准适用于评价气体、挥发性物质或气溶胶/颗粒物等化学品的急性吸人毒性作用。

2术语和定义

2.1

急性吸入毒性

实验动物短时间(24 h内)持续吸入一种可吸人性受试样品后﹐在短期内出现的健康损害效应。

半数致死浓度

在一定时间内经呼吸道吸入受试样品后引起受试动物发生死亡概率为50%的浓度﹐以单位体积空 气中受试样品的质量(mg/m')来表示。

2.3

剂量-反应关系

化学毒物的剂量与某一群体中质效应发生率之间的关系。

3试验目的

检测化学品对实验动物的急性吸人群性作用和强度,为亚急(慢)性等吸人毒性试验提供剂册选择 的依据。

4试验基本原则

各试验组动物在一定时间内吸人不同浓度的受试样品,染非浓度的选择可通过预试验确定。染赤 后观察动物的毒性反应和死亡情况。试验期间死亡的动物要进行尸检,试验结束时仍存活的动物娶处 死并进行大体解剖。

5试验方法

5.1实验动物

健康成年小鼠(18g~22g)或大鼠(180g~220g),也可选用其他敏感动物。同性别各剂量组 个体间体重相差不超过平均体重的20%。试验前动物要在试验环境中至少适应3d~5d时间.

5.2剂量设计

根据所选方法的要求,原则上应设1~5个剂量组,每组动物一般为10只,雌雄各半。各剂量组问 距大小以受试物毒性大小和动物死亡为宜,通常以较大组距和较少册动物进行预试。如果受试样品非 性很低,也可采用一次限量法,即用20只动物(雌雄各半),一般2000mg/m’吸人4h,如未引起动物死 亡,则不再进行多个剂量的急性吸人毒性试验。需要时也可做5000mg/m’或更高浓度吸人4h,或以 Zui大可能发生的浓度进行试验。

5.3染毒

染毒可采用静式染毒法或动式染毒法

5.3.1静式染毒法

静式染张是将实验动物放在一定体积的密闭容器(染非柜)内,加人一定量的受试样品,并使其挥 发,造成试验需要的受试样品浓度的空气,一次吸人性染毒2h或4h。

5.3.1.1染毒柜的容积以每只染毒小鼠每小时不少于3L空气计,每只大鼠每小时不少于30L计。

5.3.1.2染毒浓度的计算:染非浓度一般应采用实际测定浓度。在染毒期间一般可测4~5次,求其平

均浓度。在无适当测试方法时。可用式(1)计算染毒浓度:

c= (aXd/V) X 10' (1)

式中:

--染非浓度,单位为毫克每立方米(mg/m'); a----加人受试样品的量,单位为毫升(mL);

d--化学品相对密度

V-染非柜容积,单位为升L)。

5.3.2动式染毒法

动式染称是采用机械近风装置,连续不断地将含有一定浓度受试样品的空气均匀不断地送入染毒 柜,空气交换量大约为12/次/h~/5次/h,并排出等量的染毒气体,维持相对稳定的染毒浓度(对通过染 非柜的流动气体成不向断地进行监测,并至少记录|2次)。一次吸人性染毒h。当受试化合物需要特 殊要求时,应用其他的气流速率。染毒时，染赤柜内应确保至少有19%的氧含量和均衡分配的染毒气 体。一般情况下/为确保染毒柜内空气稳定,实验动物的体积不应超过染毒柜体积的5%。且染毒柜内 应维持微调的负压，以防受试样品泄露污染周围环境、同时,应注意防止受试样品爆炸。

5.3.2.1受试样品策化(雾化)和输入的常用方法

5.3.2.1.14休受试样晶,经流是计与空气混合成一定浓度后:直接输人染毒柜。

5.3.2.1.2易挥发液体受试样品,通过空气鼓泡或适当加热促使挥发后输人染毒柜。

5.3.2.1.3若受试样品现场使用时采取喷雾法时,可采用喷雾器或超声雾化器使其苏化为气溶胶后输 人染毒柜。

5.3.2.2染毒浓度计算

染非浓度一般应采用动物呼吸带实际测定依度,至少每半小时一次,取其平均值。各测定浓度值应 在其平均值的25%以内。若无适当的测试方法,也可采用式(2)计算染毒浓度:

=[axdxqVr4V;)]X 1Q" (2)

式中:

C染海浓度,单位为毫克每立方米(mg/m'); a气化或雾化受试样品的量,单位为毫升(mL);

d-受试样品相对密度;

V;输入染器柜风册,单位为升(L);

Vi"染毒柜容积,单位为升(L)。

5.4观察期限及指标

5.4.1观察并记录染毒过程和观察期内的动物中毒和死亡情况。观察期限一般为14d,观察指标见附 录A,LCs的计算见附录B.

5.4.2对死亡动物进行尸检。观察期结束后,处死存活动物并进行大体解剖,必要时,进行病理组织学 检查。

5.5试验结果评价

评价试验结果时,应将LCo与观察到的毒性效应和尸检所见相结合考虑,LCso值是受试样品急性 毒性分级和标识以及判定受试样品经呼吸道吸人后引起动物死亡可能性大小的依据。引用LCo值时 一定要注明所用实验动物的种属、性别,染毒方式及时间长短、观察期限。评价应包括动物接触受试样品与动物异常表现(包括行为和临床改变,大体损伤、体重变化、致死效应及其他毒性作用)的发生率和 严重程度之间的关系。急性吸入毒性分级可按附录C相应的分级原则进行。